Культура клеток
Культивирование клеток представляет собой процесс, посредством которого in vitro отдельные клетки (или единственная клетка) прокариот и эукариот выращиваются в контролируемых условиях. На практике термин «культура клеток» относится в основном к выращиванию клеток, относящихся к одной ткани, полученных от многоклеточных эукариот, чаще всего животных. Историческое развитие технологии и методик выращивания культур клеток неразрывно связаны с выращиванием тканевых культур и целых органов.
История
В XIX веке английский физиолог С. Рингер разработал солевой раствор, содержащий хлориды натрия, калия, кальция и магния для поддержания биения сердца животных вне организма. В 1885 году Вильгельм Ру установил принцип культивирования тканей, извлек часть костного мозга из куриного эмбриона и держал его в теплом физрастворе в течение нескольких дней. Росс Гранвилл Харрисон, работавший в Медицинской школе Дж. Хопкинса, а затем в Йельском университете, опубликовал результаты своих экспериментов в 1907 −1910 годах, создав методологию культивирования тканей. В 1910 г. Пейтон Раус, работая с культурой клеток саркомы цыплёнка, индуцировал образование опухолей у здоровых животных. Позже это привело к открытию онкогенных вирусов (Нобелевская премия по физиологии или медицине 1966 г.).
Методы культивирования клеток получили значительное развитие в 1940-х 1950-х годах в связи с исследованиями в области вирусологии. Выращивание вирусов в культурах клеток дало возможность получения чистого вирусного материала для производства вакцин. Вакцина против полиомиелита стала одним из первых препаратов, массово произведённых с использованием технологии культивирования клеток. В 1954 г. Эндерс, Уэллер и Роббинс получили Нобелевскую премию «За открытие способности вируса полиомиелита расти в культурах различных тканей». В 1952 г. была получена широко известная линия раковых клеток человека HeLa.
Основные вехи в развитии метода культуры тканей
1885 — Ру (Roux) продемонстрировал возможность поддержания клетками куриного эмбриона жизнеспособности вне тела животного в солевом растворе.
1907 — Гаррисон (Harrison) культивировал спинной мозг амфибий в сгустке плазмы. Он пытался показать, что аксоны образуются в виде выростов отдельных нервных клеток.
1910 — Раус (Raus) с применением фильтрованного экстракта куриной опухоли индуцировал опухоль. Позднее было показано, что в основе такого эффекта лежал РНКовый вирус саркомы Рауса.
1913 — Каррель (Carrel) доказал, что в асептических условиях клетки могут расти в культуре в течение длительного времени, если их обеспечить необходимыми питательными веществами.
1948 — Эрл (Earle) и сотрудники установили, что одиночные клетки линии L в культуре формируют клоны клеток.
1952 — Джей (Gey) и сотрудники получили перевиваемую клеточную линию из карциномы шейки матки; эта клеточная линия широко известна как HeLa.
1954 — Леви-Монтальчини (Levy-Montalchini) и сотрудники показали, что в культуре ткани фактор, стимулирующий рост нервов, вызывает рост аксонов.
1955 — Игл (Eagle) - впервые систематически исследовал пищевые потребности клеток в условиях культуры ткани и обнаружил, что клетки животных способны существовать в определенной смеси низкомолекулярных веществ, дополненной некоторым количеством белков сыворотки.
1956 — Пак (Puck) и сотрудники отобрали мутантные клетки HeLa, потребности которых для роста в культуре существенно отличались от потребностей других клеток.
1958 — Темин и Рубин (Temin, Roubin) количественно описали инфицирование клеток цыпленка в культуре очищенным вирусом саркомы Рауса. В течение следующего десятилетия Стокер, Дульбекко, Грин (Stocker, Dulbecco, Green) и другие вирусологи установили основные характеристики вирусной трансформации различных типов.
1961 — Хайфлик и Мурхед (Hayflick, Moorhend) показали, что в культуре фибробласты человека погибают после определенного числа делений.
1964 — Литлфилд (Littlefield) впервые использовал для выращивания гибридов соматических клеток селективную среду HAT. Это нововведение в сочетании с методом гибридизации клеток позволило приступить к изучению генетики соматических клеток.
1964 — Като и Такеуши (Kato, Takeuchi) получили целое растение моркови из растущей в культуре тканей клетки корня.
1965 — Хэм (Ham) предложил бессывороточную среду определенного химического состава, которая способна поддерживать рост клонов некоторых клеток животных.
1965 — Харрис и Уоткинс (Harris, Watkins) индуцировали вирусом слияние клеток мыши и человека и получили первые гетерокарионы клеток млекопитающих.
1968 — Августи-Точчо и Сато (Augusti-Tocco, Sato) адаптировали к условиям культуры клеток опухолевые клетки мыши (нейробластомы) и выделили клоны, которые реагировали на раздражение электрическим током и разрастались в нервные волокна. Одновременно получено большое количество других дифференцированных клеточных линий, включая линии скелетных мышц и печени.
1975 — Келер и Мильштейн (Kehler, Milstein) получили первые клеточные линии гибридом, секретирующих моноклональные антитела.
1976 — Сато (Sato) и сотрудники опубликовали первую серию статей, в которых было показано, что для роста в бессывороточной среде разным клеточным линиям необходимы различные смеси гормонов и факторов роста.
Основные принципы культивирования
Выделение клеток
Для культивирования вне организма живые клетки могут быть получены несколькими способами. Клетки могут быть выделены из крови, но к росту в культуре способны только лейкоциты. Моноядерные клетки могут быть выделены из мягких тканей с помощью таких ферментов, как коллагеназа, трипсин, проназа, разрушающих внеклеточный матрикс. Кроме того, в питательную среду можно поместить кусочки тканей и материалов.
Культуры клеток, взятых непосредственно от объекта (ex vivo), называются первичными. Большинство первичных клеток, за исключением опухолевых, имеют ограниченный срок использования. После определённого количества делений такие клетки стареют и прекращают делиться, хотя могут при этом сохранить жизнеспособность.
Существуют иммортализованные («бессмертные») линии клеток, способные размножаться бесконечно. У большинства опухолевых клеток эта способность является результатом случайной мутации, но у некоторых лабораторных клеточных линий она приобретена искусственно, путём активации гена теломеразы.
Культивирование клеток
Клетки выращивают в специальных питательных средах, при постоянной температуре. Для культур растительных клеток используется регулируемое освещение, а для клеток млекопитающих обычно необходима также специальная газовая среда, поддерживаемая в инкубаторе клеточных культур. Как правило, регулируется концентрация в воздухе углекислого газа и паров воды, но иногда также и кислорода. Питательные среды для разных культур клеток различаются по составу, pH, концентрации глюкозы, составу факторов роста и др. Факторы роста, используемые в питательных средах для клеток млекопитающих, чаще всего добавляют вместе с сывороткой крови. Одним из факторов риска при этом является возможность заражения культуры клеток прионами или вирусами. При культивировании одной из важных задач является исключение или сведение к минимуму использование заражённых ингредиентов. Однако на практике это бывает достигнуто не всегда. Наилучшим, но и наиболее дорогостоящим способом является добавление вместо сыворотки очищенных факторов роста.
Клетки можно выращивать в суспензии, либо в адгезивном состоянии. Некоторые клетки (такие, как клетки крови) в естественных условиях существуют во взвешенном состоянии. Существуют также линии клеток, искусственно изменённых таким образом, чтобы они не могли прикрепляться к поверхности; это сделано для того, чтобы увеличить плотность клеток в культуре. Для выращивания адгезивных клеток требуется поверхность, например, культура ткани, или пластик, покрытый элементами внеклеточного матрикса для улучшения адгезивных свойств, а также для стимулирования роста и дифференцировки. Большинство клеток из мягких и твердых тканей адгезивны. Из адгезивного типа культуры выделяются органотипические культуры клеток, которые представляют собой трёхмерную среду, в отличие от обычной лабораторной посуды. Эта система культивирования физически и биохимически наиболее сходна с живыми тканями, но имеет некоторые технические сложности в обслуживании (например, нуждается в диффузии). С целью обеспечения необходимых физических условий для культивирования адгезивных культур и заселения объёма внеклеточного матрикса тканеинженерных конструкций используются системы динамического культивирования на основе роторных и вихревых биореакторов, биореакторов с непосредственным на скаффолд: компрессионных биореакторов, биореакторов с механическим натяжением и гидростатическим давлением, специальных биореакторов для электростимуляции клеток и тканей, а также комбинированных биореакторов.
Перекрёстное загрязнение клеточных линий
При работе с клеточными культурами учёные могут столкнуться с проблемой перекрёстного загрязнения.
Особенности выращивания клеток
При выращивании клеток, из-за постоянного деления может возникнуть их переизбыток в культуре, и, как следствие, возникают следующие проблемы:
- Накопление в питательной среде продуктов выделения, в том числе токсичных.
- Накопление в культуре омертвевших клеток, прекративших жизнедеятельность.
- Скопление большого количества клеток оказывает негативное влияние на клеточный цикл, рост и деление замедляются, а клетки начинают стареть и отмирать ().
- По той же причине может начаться клеточное дифференцирование.
Для поддержания нормального функционирования культур клеток а также для предотвращения негативных явлений периодически проводят замену питательной среды, пассирование и трансфекция клеток. Во избежание загрязнения культур бактериями, дрожжами, или другими линиями клеток, все манипуляции обычно проводят с соблюдением правил асептики в стерильном боксе. Для подавления микрофлоры в питательную среду могут быть добавлены антибиотики (пенициллин, стрептомицин) и противогрибковые препараты (амфотерицин B).
Одним из продуктов метаболизма в клетках являются кислоты, вследствие чего pH среды постепенно снижается. Для контроля кислотности питательных сред, в них добавляют индикаторы pH.
Если культура клеток адгезивная, питательную среду можно полностью заменять.
Пассирование клеток
Пассирование (разделение) клеток — это отбор небольшого количества клеток для выращивания в другом лабораторном сосуде. Если культура быстро растет, это необходимо делать регулярно, поскольку в среде истощаются питательные вещества и накапливаются продукты метаболизма. Суспензивные культуры пассировать проще, так как для этого достаточно всего лишь отобрать необходимое количество клеток, поместить их в другие сосуды, и добавить свежей питательной среды. Адгезивные же клетки перед этим следует отделить от субстрата и разделить их скопления. Чаще всего для этой цели используют смесь трипсина и ЭДТА или другие ферментные смеси, иногда достаточно только ЭДТА в физиологическом растворе (раствор Версена). Если культура растет медленно, её обычно подкармливают без переноса в другой сосуд, периодически (обычно раз в 2-3 дня) отбирая часть использованной среды и добавляя свежую.
Трансфекция и трансдукция
В клетки при их выращивании можно внедрять чужеродную ДНК путём трансфекции (невирусный метод). Часто данную технологию применяют для управляемой экспрессии генов. Сравнительно недавно для этих целей была успешно реализована трансфекция иРНК.
ДНК также может быть внедрена в геном клетки с помощью вирусов или бактериофагов. Они, являясь внутриклеточными паразитами, как нельзя лучше подходят для этих целей, так как внедрение генетического материала в клетку-хозяина является обычной частью их жизненного цикла. Этот метод называется трансдукция.
Линии клеток человека
Культивирование человеческих клеток несколько противоречит правилам биоэтики, поскольку изолированно выращиваемые клетки могут пережить родительский организм, а затем использоваться для проведения экспериментов или для разработки новых методов лечения и извлечения из этого прибыли. Первое судебное решение в данной области было вынесено в Верховном суде штата Калифорния по делу «Джон Мур против представителей Калифорнийского университета», согласно которому пациенты не имеют никаких прав собственности на линии клеток, полученных из органов, удалённых с их согласия.
Гибридома
Гибридома — это линия клеток, полученная в результате слияния нормальных лимфоцитов с «бессмертными» раковыми клетками. Используется для получения моноклональных антител. Лейкоциты, выделенные из селезёнки или крови иммунизированных животных, производят антитела с необходимой специфичностью, но как у любой первичной культуры, их способность к пролиферации ограничена пределом Хейфлика. Для иммортализации их искусственно сливают с «бессмертной» линией клеток миеломы, в результате чего происходит рекомбинация признаков. После этого линию клонируют и отбирают клоны, способные одновременно к неограниченной пролиферации и производящие антитела против избранного антигена.
Использование клеточных культур
Массовое культивирование клеток является основой для промышленного производства вирусных вакцин и разнообразных продуктов биотехнологии.
Продукты биотехнологии
Промышленным методом из культур клеток получают такие продукты, как ферменты, синтетические гормоны, моноклональные антитела, интерлейкины, лимфокины, противоопухолевые препараты. Хотя многие простые белки относительно просто могут быть получены с использованием в бактериальных культурах, более сложные белки, такие как гликопротеины, в настоящее время могут быть получены только из животных клеток. Одним из таких важнейших белков является гормон эритропоэтин. Стоимость выращивания культур клеток млекопитающих является довольно высокой, поэтому в настоящее время проводятся исследования по возможности производства сложных белков в культурах клеток насекомых или высших растений.
Тканевые культуры
Культивирование клеток является неотъемлемой частью технологии культивирования тканей и тканевой инженерии, поскольку именно оно определяет основы выращивания клеток и поддержания их в жизнеспособном состоянии ex vivo.
Вакцины
С применением методики культивирования клеток в настоящее время выпускаются вакцины против полиомиелита, кори, эпидемического паротита, краснухи, ветрянки. Вследствие угрозы пандемии гриппа, вызываемого штаммом вируса H5N1, в настоящий момент правительство Соединённых Штатов финансирует исследования по получению вакцины против птичьего гриппа с использованием клеточных культур.
Культуры клеток не млекопитающих
Культуры клеток растений
Культуры клеток растений, как правило, выращиваются либо в виде суспензии в жидкой питательной среде, либо в виде каллусной культуры на твердой питательной основе. Культивирование недифференцированных клеток и каллуса требует соблюдения определённого баланса гормонов роста растений ауксинов и цитокининов.
Бактериальные, дрожжевые культуры
Для культивирования небольшого количества клеток бактерий и дрожжей клетки высеивают на твердую питательную среду на основе желатина или агар-агара. Для массового производства применяют выращивание в жидких питательных средах (бульонах).
Вирусные культуры
Культуры вирусов выращивают на культурах клеток млекопитающих, растений, грибов или бактерий, в зависимости от природного хозяина конкретного типа вирусов. Но при некоторых условиях могут быть выращены и в клетках другого типа.
В этом случае культура клеток сама служит средой для роста и репликации вируса.
Виды клеточных линий
Это пустой раздел, который еще не написан. |
Краткий перечень клеточных линий
Приведённый здесь список наиболее распространённых клеточных линий не является полным и исчерпывающим.
| Линия клеток | Расшифровка сокращения | Организм | Ткань | Морфология | Примечания и ссылки | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 293-T | человек | почка (эмбриональная) | Производная от HEK-293 ECACC | |||
| 3T3 cells | «3-day transfer, inoculum 3 x 105 cells» | мышь | эмбриональные фибробласты | Известна также как NIH 3T3 CLS ECACC | ||
| 721 | человек | меланома | ||||
| 9L | крыса | глиобластома | ||||
| A2780 | человек | яичник | рак яичника | ECACC | ||
| A2780ADR | человек | яичник | производное A2780 с резистентностью к адриамицину | ECACC | ||
| A2780cis | человек | яичник | производное A2780 с резистентностью к цисплатину | ECACC | ||
| A172 | человек | глиобластома | злокачественная глиома | CLS ECACC | ||
| A431 | человек | кожный эпителий | плоскоклеточная карцинома | CLS ECACCCell Line Data Base | ||
| A-549 | человек | карцинома лёгких | эпителий | CLS DSMZECACC | ||
| B35 | крыса | нейробластома | ATCC (недоступная ссылка) | |||
| BCP-1 | человек | периферические лейкоциты | HIV+ лимфома | ATCC | ||
| BEAS-2B | bronchial epithelium + adenovirus 12-SV40 virus hybrid (Ad12SV40) | человек | лёгкие | эпителий | ATCC (недоступная ссылка) | |
| bEnd.3 | brain endothelial | мышь | кора головного мозга | эндотелий | ATCC | |
| BHK-21 | «Baby Hamster Kidney» | хомяк | почка | фибробласты | CLS ECACCOlympus Архивная копия от 27 декабря 2009 на Wayback Machine | |
| BR 293 | человек | молочная железа | рак | |||
| BxPC3 | Biopsy xenograph of pancreatic carcinoma line 3 | человек | панкреатическая аденокарцинома | эпителий | ATCC (недоступная ссылка) | |
| C3H-10T1/2 | мышь | эмбриональные мезенхимальные клетки | ECACC | |||
| C6/36 | Aedes albopictus (комар) | ткани личинки | ECACC | |||
| CHO | Chinese hamster ovary | серый хомячок (Cricetulus griseus) | яичник | эпителий | CLS ECACCICLC (недоступная ссылка) | |
| COR-L23 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| COR-L23/CPR | человек | лёгкие | ECACC | |||
| COR-L23/5010 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| COR-L23/R23 | человек | лёгкие | эпителий | ECACC | ||
| COS-7 | Cercopithecus aethiops, origin-defective SV-40 | обезьяна Cercopithecus aethiops | почка | фибробласты | CLS ECACCATCC | |
| CML T1 | Chronic Myelod Leukaemia T-lymphocyte 1 | человек | хроническая миелоидная лейкемия | T-клеточная лейкемия | Blood | |
| CMT | canine mammary tumor | собака | молочная железа | эпителий | ||
| D17 | собака | остеосаркома | ECACC | |||
| DH82 | собака | гистиоцитоз | моноциты/макрофаги | ECACC J Vir Meth | ||
| DU145 | человек | карцинома | простата | CLS | ||
| DuCaP | Dura mater Cancer of the Prostate | человек | метастазирующий рак простаты | эпителий | 11317521 | |
| EL4 | мышь | T-клеточная лейкемия | ECACC | |||
| EMT6/AR1 | мышь | молочная железа | эпителий | ECACC | ||
| EMT6/AR10.0 | мышь | молочная железа | эпителий | ECACC | ||
| FM3 | человек | метастазы в лимфатический узел | меланома | |||
| H1299 | человек | лёгкие | рак | |||
| H69 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| HB54 | гибридома | гибридома | секретирует MA2.1 mAb (против HLA-A2 и HLA-B17) | Journal of Immunology | ||
| HB55 | гибридома | гибридома | секретирует L243 mAb (против HLA-DR) | Human Immunology | ||
| HCA2 | человек | фибробласты | Journal of General Virology | |||
| HEK-293 | human embryonic kidney | человек | почка(эмбриональная) | эпителий | CLS ATCC | |
| HeLa | Henrietta Lacks | человек | рак шейки матки | эпителий | CLS DSMZECACC | |
| Hepa1c1c7 | clone 7 of clone 1 hepatoma line 1 | мышь | гепатома | эпителий | ECACC ATCC (недоступная ссылка) | |
| HL-60 | human leukemia | человек | миелобласты | клетки крови | CLS ECACCDSMZ | |
| HMEC | human mammary epithelial cell | человек | эпителий | ECACC | ||
| HT-29 | человек | эпителий толстого кишечника | аденокарцинома | HT-29 ECACC Cell Line Data Base | ||
| Jurkat | человек | T-клеточная лейкемия | белые клетки крови | ECACC DSMZ | ||
| JY | человек | лимфобласты | В-клетки, иммортализованные EBV | |||
| K562 | человек | лимфобласты | хроническая миелоидная лейкемия | CLS ECACC | ||
| Ku812 | человек | лимфобласты | эритролейкемия | ECACC LGCstandards | ||
| KCL22 | человек | лимфобласты | хроническая миелоидная лейкемия | |||
| KYO1 | Kyoto 1 | человек | лимфобласты | хроническая миелоидная лейкемия | DSMZ | |
| LNCap | Lymph node Cancer of the Prostate | человек | аденокарцинома простаты | эпителий | CLS ECACCATCC (недоступная ссылка) | |
| Ma-Mel 1, 2, 3….48 | человек | линии клеток меланомы | ||||
| MC-38 | мышь | аденокарцинома | ||||
| MCF-7 | Michigan Cancer Foundation-7 | человек | молочная железа | инвазивная карцинома протоков молочной железы | ER+, PR+ | CLS |
| MCF-10A | Michigan Cancer Foundation | человек | молочная железа | эпителий | ATCC | |
| MDA-MB-231 | M.D. Anderson — Metastatic Breast | человек | молочная железа | рак | ECACC | |
| MDA-MB-468 | M.D. Anderson — Metastatic Breast | человек | молочная железа | рак | ECACC | |
| MDA-MB-435 | M.D. Anderson — Metastatic Breast | человек | молочная железа | меланома или карцинома (единого мнения нет) | Cambridge Pathology ECACC | |
| MDCK II | Madin Darby canine kidney | собака | почка | эпителий | CLS ECACC ATCC | |
| MOR/0.2R | человек | лёгкие | ECACC | |||
| NCI-H69/CPR | человек | лёгкие | ECACC | |||
| NCI-H69/LX10 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| NCI-H69/LX20 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| NCI-H69/LX4 | человек | лёгкие | ECACC | |||
| NIH-3T3 | National Institutes of Health, 3-day transfer, inoculum 3 x 105 cells | мышь | эмбрион | фибробласты | CLS ECACCATCC | |
| NALM-1 | периферическая кровь | хроническая миелоидная лейкемия | Cancer Genetics and Cytogenetics | |||
| NW-145 | меланома | ESTDAB Архивная копия от 16 ноября 2011 на Wayback Machine | ||||
| OPCN / OPCT | Onyvax [1] Prostate Cancer…. | человек | линии клеток рака простаты | Asterand Архивная копия от 7 июля 2011 на Wayback Machine | ||
| Peer | человек | T-клеточная лейкемия | DSMZ | |||
| PNT-1A / PNT 2 | линии клеток рака простаты | ECACC | ||||
| RenCa | Renal Carcinoma | мышь | карцинома почки | CLS | ||
| RIN-5F | мышь | поджелудочная железа | ||||
| RMA/RMAS | мышь | T-клеточный рак | ||||
| Saos-2 | человек | остеоксаркома | CLS ECACC | |||
| Sf-9 | Spodoptera frugiperda | бабочка Spodoptera frugiperda | яичник | CLS DSMZECACC | ||
| SkBr3 | человек | карцинома молочной железы | CLS | |||
| T2 | человек | гибридома В-клеток и Т-клеточной лейкемии | DSMZ | |||
| T-47D | человек | молочная железа | карцинома протоков | CLS | ||
| T84 | человек | карцинома толстого кишечника/ метастазы в легкое | эпителий | [2] ECACCATCC | ||
| THP1 | человек | моноциты | острая миелоидная лейкемия | CLS ECACC | ||
| U373 | человек | глиобластома-астроцитома | эпителий | |||
| U87 | человек | глиобластома-астроцитома | эпителий | CLS Abcam | ||
| U937 | человек | лейкемическая моноцитарная лимфома | CLS ECACC | |||
| VCaP | Vertebra Prostate Cancer | человек | метастазирующий рак простаты | эпителий | ECACC ATCC Архивная копия от 19 февраля 2012 на Wayback Machine | |
| Vero | 'Vera Reno' ('почка зелёной') / 'Vero' ('истина') | африканская зелёная мартышка | эпителий почки | CLS ECACC | ||
| WM39 | человек | кожа | первичная меланома | |||
| WT-49 | человек | лимфобласты | ||||
| X63 | мышь | меланома | ||||
| YAC-1 | мышь | лимфома | Cell Line Data Base CLS ECACC | |||
| YAR | человек | B-лимфоциты | трансформированы EBV | [3] Human Immunology Архивная копия от 20 сентября 2008 на Wayback Machine |
См. также
- Биологическое бессмертие
- Культура тканей
- Выращивание органов
- Биотехнология
- Индуцированные стволовые клетки
- Ниша стволовой клетки
- Питательная среда для эмбрионов
- Культура клеток и тканей
Примечания
- Раствор Рингера
- Архивированная копия. Дата обращения: 24 марта 2009. Архивировано из оригинала 1 сентября 2006 года.
- Альбертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Робертс К., Уотсон Дж. — Молекулярная биология клетки: В 3-х т. 2-е изд., перераб. М75 и доп. Т. 1. Пер. с англ.-М.: Мир, 1994.-517 с., ил. ISBN 5-03-001985-5
- Клетки можно выделить из тканей и разделить на различные типы. Дата обращения: 24 марта 2009. Архивировано из оригинала 26 мая 2009 года.
- ЛабоRUтория. Культивирование клеток и тканей. www.primer.ru (2003). Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 10 мая 2003 года.
- Теломераза. Тёмная материя (15 сентября 2006). Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 20 декабря 2007 года.
- Maqsood MI, Matin MM, Bahrami AR, Ghasroldasht MM (2013). Immortality of cell lines: challenges and advantages of establishment. Cell Biology International. 37 (10), 1038–1045. doi:10.1002/cbin.10137 PMID 23723166
- Инкубаторы СО2 Binder (Германия). Техсервис. Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 19 ноября 2012 года.
- Лабораторное оборудование и расходные материалы. Инкубаторы (2007). Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 8 июня 2012 года.
- С помощью сред определённого химического состава можно идентифицировать специфические факторы роста. Дата обращения: 24 марта 2009. Архивировано из оригинала 10 ноября 2007 года.
- LipiMAX purified lipoprotein solution from bovine serum. Selborne Biological Services (2006). Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 8 июня 2012 года.
- Люндуп А.В., Демченко А.Г., Тенчурин Т.Х., Крашенинников М.Е., Клабуков И.Д., Шепелев А.Д., Мамагулашвили В.Г., Оганесян Р.В., Орехов А.С., Чвалун С.Н., Дюжева Т.Г. Повышение эффективности заселения биодеградируемых матриксов стромальными и эпителиальными клетками при динамическом культивировании // Гены и клетки. — 2016. — Т. 11, № 3. — С. 102—107. — ISSN 2313-1829.
- Гуллер А.Е., Гребенюк П.Н., Шехтер А.Б., Звягин А.В., Деев С.М. Тканевая инженерия опухолей с использованием биореакторных технологий // Acta Naturae (русскоязычная версия). — 2016. — Т. 8, № 3. — С. 49—65. — ISSN 2075-8243.
- Механизм инфицирования вируса
- В.Богомолова. Кому принадлежит наше тело? Arcanus (3 августа 2009). Дата обращения: 27 марта 2010. Архивировано 5 марта 2016 года.
Ссылки
Википедия, чтение, книга, библиотека, поиск, нажмите, истории, книги, статьи, wikipedia, учить, информация, история, скачать, скачать бесплатно, mp3, видео, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, картинка, музыка, песня, фильм, игра, игры, мобильный, телефон, Android, iOS, apple, мобильный телефон, Samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, ПК, web, Сеть, компьютер, Информация о Культура клеток, Что такое Культура клеток? Что означает Культура клеток?
Kultivirovanie kletok predstavlyaet soboj process posredstvom kotorogo in vitro otdelnye kletki ili edinstvennaya kletka prokariot i eukariot vyrashivayutsya v kontroliruemyh usloviyah Na praktike termin kultura kletok otnositsya v osnovnom k vyrashivaniyu kletok otnosyashihsya k odnoj tkani poluchennyh ot mnogokletochnyh eukariot chashe vsego zhivotnyh Istoricheskoe razvitie tehnologii i metodik vyrashivaniya kultur kletok nerazryvno svyazany s vyrashivaniem tkanevyh kultur i celyh organov Okrashennaya kultivaciya kletok epiteliya Na foto keratin krasnyj i DNK zelyonaya IstoriyaV XIX veke anglijskij fiziolog S Ringer razrabotal solevoj rastvor soderzhashij hloridy natriya kaliya kalciya i magniya dlya podderzhaniya bieniya serdca zhivotnyh vne organizma V 1885 godu Vilgelm Ru ustanovil princip kultivirovaniya tkanej izvlek chast kostnogo mozga iz kurinogo embriona i derzhal ego v teplom fizrastvore v techenie neskolkih dnej Ross Granvill Harrison rabotavshij v Medicinskoj shkole Dzh Hopkinsa a zatem v Jelskom universitete opublikoval rezultaty svoih eksperimentov v 1907 1910 godah sozdav metodologiyu kultivirovaniya tkanej V 1910 g Pejton Raus rabotaya s kulturoj kletok sarkomy cyplyonka induciroval obrazovanie opuholej u zdorovyh zhivotnyh Pozzhe eto privelo k otkrytiyu onkogennyh virusov Nobelevskaya premiya po fiziologii ili medicine 1966 g Metody kultivirovaniya kletok poluchili znachitelnoe razvitie v 1940 h 1950 h godah v svyazi s issledovaniyami v oblasti virusologii Vyrashivanie virusov v kulturah kletok dalo vozmozhnost polucheniya chistogo virusnogo materiala dlya proizvodstva vakcin Vakcina protiv poliomielita stala odnim iz pervyh preparatov massovo proizvedyonnyh s ispolzovaniem tehnologii kultivirovaniya kletok V 1954 g Enders Ueller i Robbins poluchili Nobelevskuyu premiyu Za otkrytie sposobnosti virusa poliomielita rasti v kulturah razlichnyh tkanej V 1952 g byla poluchena shiroko izvestnaya liniya rakovyh kletok cheloveka HeLa Osnovnye vehi v razvitii metoda kultury tkanej 1885 Ru Roux prodemonstriroval vozmozhnost podderzhaniya kletkami kurinogo embriona zhiznesposobnosti vne tela zhivotnogo v solevom rastvore 1907 Garrison Harrison kultiviroval spinnoj mozg amfibij v sgustke plazmy On pytalsya pokazat chto aksony obrazuyutsya v vide vyrostov otdelnyh nervnyh kletok 1910 Raus Raus s primeneniem filtrovannogo ekstrakta kurinoj opuholi induciroval opuhol Pozdnee bylo pokazano chto v osnove takogo effekta lezhal RNKovyj virus sarkomy Rausa 1913 Karrel Carrel dokazal chto v asepticheskih usloviyah kletki mogut rasti v kulture v techenie dlitelnogo vremeni esli ih obespechit neobhodimymi pitatelnymi veshestvami 1948 Erl Earle i sotrudniki ustanovili chto odinochnye kletki linii L v kulture formiruyut klony kletok 1952 Dzhej Gey i sotrudniki poluchili perevivaemuyu kletochnuyu liniyu iz karcinomy shejki matki eta kletochnaya liniya shiroko izvestna kak HeLa 1954 Levi Montalchini Levy Montalchini i sotrudniki pokazali chto v kulture tkani faktor stimuliruyushij rost nervov vyzyvaet rost aksonov 1955 Igl Eagle vpervye sistematicheski issledoval pishevye potrebnosti kletok v usloviyah kultury tkani i obnaruzhil chto kletki zhivotnyh sposobny sushestvovat v opredelennoj smesi nizkomolekulyarnyh veshestv dopolnennoj nekotorym kolichestvom belkov syvorotki 1956 Pak Puck i sotrudniki otobrali mutantnye kletki HeLa potrebnosti kotoryh dlya rosta v kulture sushestvenno otlichalis ot potrebnostej drugih kletok 1958 Temin i Rubin Temin Roubin kolichestvenno opisali inficirovanie kletok cyplenka v kulture ochishennym virusom sarkomy Rausa V techenie sleduyushego desyatiletiya Stoker Dulbekko Grin Stocker Dulbecco Green i drugie virusologi ustanovili osnovnye harakteristiki virusnoj transformacii razlichnyh tipov 1961 Hajflik i Murhed Hayflick Moorhend pokazali chto v kulture fibroblasty cheloveka pogibayut posle opredelennogo chisla delenij 1964 Litlfild Littlefield vpervye ispolzoval dlya vyrashivaniya gibridov somaticheskih kletok selektivnuyu sredu HAT Eto novovvedenie v sochetanii s metodom gibridizacii kletok pozvolilo pristupit k izucheniyu genetiki somaticheskih kletok 1964 Kato i Takeushi Kato Takeuchi poluchili celoe rastenie morkovi iz rastushej v kulture tkanej kletki kornya 1965 Hem Ham predlozhil bessyvorotochnuyu sredu opredelennogo himicheskogo sostava kotoraya sposobna podderzhivat rost klonov nekotoryh kletok zhivotnyh 1965 Harris i Uotkins Harris Watkins inducirovali virusom sliyanie kletok myshi i cheloveka i poluchili pervye geterokariony kletok mlekopitayushih 1968 Avgusti Tochcho i Sato Augusti Tocco Sato adaptirovali k usloviyam kultury kletok opuholevye kletki myshi nejroblastomy i vydelili klony kotorye reagirovali na razdrazhenie elektricheskim tokom i razrastalis v nervnye volokna Odnovremenno polucheno bolshoe kolichestvo drugih differencirovannyh kletochnyh linij vklyuchaya linii skeletnyh myshc i pecheni 1975 Keler i Milshtejn Kehler Milstein poluchili pervye kletochnye linii gibridom sekretiruyushih monoklonalnye antitela 1976 Sato Sato i sotrudniki opublikovali pervuyu seriyu statej v kotoryh bylo pokazano chto dlya rosta v bessyvorotochnoj srede raznym kletochnym liniyam neobhodimy razlichnye smesi gormonov i faktorov rosta Osnovnye principy kultivirovaniyaVydelenie kletok Dlya kultivirovaniya vne organizma zhivye kletki mogut byt polucheny neskolkimi sposobami Kletki mogut byt vydeleny iz krovi no k rostu v kulture sposobny tolko lejkocity Monoyadernye kletki mogut byt vydeleny iz myagkih tkanej s pomoshyu takih fermentov kak kollagenaza tripsin pronaza razrushayushih vnekletochnyj matriks Krome togo v pitatelnuyu sredu mozhno pomestit kusochki tkanej i materialov Kultury kletok vzyatyh neposredstvenno ot obekta ex vivo nazyvayutsya pervichnymi Bolshinstvo pervichnyh kletok za isklyucheniem opuholevyh imeyut ogranichennyj srok ispolzovaniya Posle opredelyonnogo kolichestva delenij takie kletki stareyut i prekrashayut delitsya hotya mogut pri etom sohranit zhiznesposobnost Sushestvuyut immortalizovannye bessmertnye linii kletok sposobnye razmnozhatsya beskonechno U bolshinstva opuholevyh kletok eta sposobnost yavlyaetsya rezultatom sluchajnoj mutacii no u nekotoryh laboratornyh kletochnyh linij ona priobretena iskusstvenno putyom aktivacii gena telomerazy Kultivirovanie kletok Kletki vyrashivayut v specialnyh pitatelnyh sredah pri postoyannoj temperature Dlya kultur rastitelnyh kletok ispolzuetsya reguliruemoe osveshenie a dlya kletok mlekopitayushih obychno neobhodima takzhe specialnaya gazovaya sreda podderzhivaemaya v inkubatore kletochnyh kultur Kak pravilo reguliruetsya koncentraciya v vozduhe uglekislogo gaza i parov vody no inogda takzhe i kisloroda Pitatelnye sredy dlya raznyh kultur kletok razlichayutsya po sostavu pH koncentracii glyukozy sostavu faktorov rosta i dr Faktory rosta ispolzuemye v pitatelnyh sredah dlya kletok mlekopitayushih chashe vsego dobavlyayut vmeste s syvorotkoj krovi Odnim iz faktorov riska pri etom yavlyaetsya vozmozhnost zarazheniya kultury kletok prionami ili virusami Pri kultivirovanii odnoj iz vazhnyh zadach yavlyaetsya isklyuchenie ili svedenie k minimumu ispolzovanie zarazhyonnyh ingredientov Odnako na praktike eto byvaet dostignuto ne vsegda Nailuchshim no i naibolee dorogostoyashim sposobom yavlyaetsya dobavlenie vmesto syvorotki ochishennyh faktorov rosta Kletki mozhno vyrashivat v suspenzii libo v adgezivnom sostoyanii Nekotorye kletki takie kak kletki krovi v estestvennyh usloviyah sushestvuyut vo vzveshennom sostoyanii Sushestvuyut takzhe linii kletok iskusstvenno izmenyonnyh takim obrazom chtoby oni ne mogli prikreplyatsya k poverhnosti eto sdelano dlya togo chtoby uvelichit plotnost kletok v kulture Dlya vyrashivaniya adgezivnyh kletok trebuetsya poverhnost naprimer kultura tkani ili plastik pokrytyj elementami vnekletochnogo matriksa dlya uluchsheniya adgezivnyh svojstv a takzhe dlya stimulirovaniya rosta i differencirovki Bolshinstvo kletok iz myagkih i tverdyh tkanej adgezivny Iz adgezivnogo tipa kultury vydelyayutsya organotipicheskie kultury kletok kotorye predstavlyayut soboj tryohmernuyu sredu v otlichie ot obychnoj laboratornoj posudy Eta sistema kultivirovaniya fizicheski i biohimicheski naibolee shodna s zhivymi tkanyami no imeet nekotorye tehnicheskie slozhnosti v obsluzhivanii naprimer nuzhdaetsya v diffuzii S celyu obespecheniya neobhodimyh fizicheskih uslovij dlya kultivirovaniya adgezivnyh kultur i zaseleniya obyoma vnekletochnogo matriksa tkaneinzhenernyh konstrukcij ispolzuyutsya sistemy dinamicheskogo kultivirovaniya na osnove rotornyh i vihrevyh bioreaktorov bioreaktorov s neposredstvennym na skaffold kompressionnyh bioreaktorov bioreaktorov s mehanicheskim natyazheniem i gidrostaticheskim davleniem specialnyh bioreaktorov dlya elektrostimulyacii kletok i tkanej a takzhe kombinirovannyh bioreaktorov Perekryostnoe zagryaznenie kletochnyh linij Pri rabote s kletochnymi kulturami uchyonye mogut stolknutsya s problemoj perekryostnogo zagryazneniya Osobennosti vyrashivaniya kletok Pri vyrashivanii kletok iz za postoyannogo deleniya mozhet vozniknut ih pereizbytok v kulture i kak sledstvie voznikayut sleduyushie problemy Nakoplenie v pitatelnoj srede produktov vydeleniya v tom chisle toksichnyh Nakoplenie v kulture omertvevshih kletok prekrativshih zhiznedeyatelnost Skoplenie bolshogo kolichestva kletok okazyvaet negativnoe vliyanie na kletochnyj cikl rost i delenie zamedlyayutsya a kletki nachinayut staret i otmirat Po toj zhe prichine mozhet nachatsya kletochnoe differencirovanie Dlya podderzhaniya normalnogo funkcionirovaniya kultur kletok a takzhe dlya predotvrasheniya negativnyh yavlenij periodicheski provodyat zamenu pitatelnoj sredy passirovanie i transfekciya kletok Vo izbezhanie zagryazneniya kultur bakteriyami drozhzhami ili drugimi liniyami kletok vse manipulyacii obychno provodyat s soblyudeniem pravil aseptiki v sterilnom bokse Dlya podavleniya mikroflory v pitatelnuyu sredu mogut byt dobavleny antibiotiki penicillin streptomicin i protivogribkovye preparaty amfotericin B Odnim iz produktov metabolizma v kletkah yavlyayutsya kisloty vsledstvie chego pH sredy postepenno snizhaetsya Dlya kontrolya kislotnosti pitatelnyh sred v nih dobavlyayut indikatory pH Esli kultura kletok adgezivnaya pitatelnuyu sredu mozhno polnostyu zamenyat Passirovanie kletok Passirovanie razdelenie kletok eto otbor nebolshogo kolichestva kletok dlya vyrashivaniya v drugom laboratornom sosude Esli kultura bystro rastet eto neobhodimo delat regulyarno poskolku v srede istoshayutsya pitatelnye veshestva i nakaplivayutsya produkty metabolizma Suspenzivnye kultury passirovat proshe tak kak dlya etogo dostatochno vsego lish otobrat neobhodimoe kolichestvo kletok pomestit ih v drugie sosudy i dobavit svezhej pitatelnoj sredy Adgezivnye zhe kletki pered etim sleduet otdelit ot substrata i razdelit ih skopleniya Chashe vsego dlya etoj celi ispolzuyut smes tripsina i EDTA ili drugie fermentnye smesi inogda dostatochno tolko EDTA v fiziologicheskom rastvore rastvor Versena Esli kultura rastet medlenno eyo obychno podkarmlivayut bez perenosa v drugoj sosud periodicheski obychno raz v 2 3 dnya otbiraya chast ispolzovannoj sredy i dobavlyaya svezhuyu Transfekciya i transdukciya Osnovnye stati Transfekciya i Transdukciya genetika V kletki pri ih vyrashivanii mozhno vnedryat chuzherodnuyu DNK putyom transfekcii nevirusnyj metod Chasto dannuyu tehnologiyu primenyayut dlya upravlyaemoj ekspressii genov Sravnitelno nedavno dlya etih celej byla uspeshno realizovana transfekciya iRNK DNK takzhe mozhet byt vnedrena v genom kletki s pomoshyu virusov ili bakteriofagov Oni yavlyayas vnutrikletochnymi parazitami kak nelzya luchshe podhodyat dlya etih celej tak kak vnedrenie geneticheskogo materiala v kletku hozyaina yavlyaetsya obychnoj chastyu ih zhiznennogo cikla Etot metod nazyvaetsya transdukciya Linii kletok cheloveka Odna iz samyh rannih kultur kletok cheloveka poluchennaya ot Genrietty Laks kotoraya umerla ot raka shejki matki Kultura kletok HeLa okrashena po Hojstu Izmenyonnye yadra okrasheny v sinij cvet Kultivirovanie chelovecheskih kletok neskolko protivorechit pravilam bioetiki poskolku izolirovanno vyrashivaemye kletki mogut perezhit roditelskij organizm a zatem ispolzovatsya dlya provedeniya eksperimentov ili dlya razrabotki novyh metodov lecheniya i izvlecheniya iz etogo pribyli Pervoe sudebnoe reshenie v dannoj oblasti bylo vyneseno v Verhovnom sude shtata Kaliforniya po delu Dzhon Mur protiv predstavitelej Kalifornijskogo universiteta soglasno kotoromu pacienty ne imeyut nikakih prav sobstvennosti na linii kletok poluchennyh iz organov udalyonnyh s ih soglasiya Gibridoma Osnovnaya statya Gibridoma Gibridoma eto liniya kletok poluchennaya v rezultate sliyaniya normalnyh limfocitov s bessmertnymi rakovymi kletkami Ispolzuetsya dlya polucheniya monoklonalnyh antitel Lejkocity vydelennye iz selezyonki ili krovi immunizirovannyh zhivotnyh proizvodyat antitela s neobhodimoj specifichnostyu no kak u lyuboj pervichnoj kultury ih sposobnost k proliferacii ogranichena predelom Hejflika Dlya immortalizacii ih iskusstvenno slivayut s bessmertnoj liniej kletok mielomy v rezultate chego proishodit rekombinaciya priznakov Posle etogo liniyu kloniruyut i otbirayut klony sposobnye odnovremenno k neogranichennoj proliferacii i proizvodyashie antitela protiv izbrannogo antigena Ispolzovanie kletochnyh kulturMassovoe kultivirovanie kletok yavlyaetsya osnovoj dlya promyshlennogo proizvodstva virusnyh vakcin i raznoobraznyh produktov biotehnologii Produkty biotehnologii Promyshlennym metodom iz kultur kletok poluchayut takie produkty kak fermenty sinteticheskie gormony monoklonalnye antitela interlejkiny limfokiny protivoopuholevye preparaty Hotya mnogie prostye belki otnositelno prosto mogut byt polucheny s ispolzovaniem v bakterialnyh kulturah bolee slozhnye belki takie kak glikoproteiny v nastoyashee vremya mogut byt polucheny tolko iz zhivotnyh kletok Odnim iz takih vazhnejshih belkov yavlyaetsya gormon eritropoetin Stoimost vyrashivaniya kultur kletok mlekopitayushih yavlyaetsya dovolno vysokoj poetomu v nastoyashee vremya provodyatsya issledovaniya po vozmozhnosti proizvodstva slozhnyh belkov v kulturah kletok nasekomyh ili vysshih rastenij Tkanevye kultury Kultivirovanie kletok yavlyaetsya neotemlemoj chastyu tehnologii kultivirovaniya tkanej i tkanevoj inzhenerii poskolku imenno ono opredelyaet osnovy vyrashivaniya kletok i podderzhaniya ih v zhiznesposobnom sostoyanii ex vivo Vakciny S primeneniem metodiki kultivirovaniya kletok v nastoyashee vremya vypuskayutsya vakciny protiv poliomielita kori epidemicheskogo parotita krasnuhi vetryanki Vsledstvie ugrozy pandemii grippa vyzyvaemogo shtammom virusa H5N1 v nastoyashij moment pravitelstvo Soedinyonnyh Shtatov finansiruet issledovaniya po polucheniyu vakciny protiv ptichego grippa s ispolzovaniem kletochnyh kultur Kultury kletok ne mlekopitayushihKultury kletok rastenij Kultury kletok rastenij kak pravilo vyrashivayutsya libo v vide suspenzii v zhidkoj pitatelnoj srede libo v vide kallusnoj kultury na tverdoj pitatelnoj osnove Kultivirovanie nedifferencirovannyh kletok i kallusa trebuet soblyudeniya opredelyonnogo balansa gormonov rosta rastenij auksinov i citokininov Bakterialnye drozhzhevye kultury Osnovnye stati i Chistaya kultura Dlya kultivirovaniya nebolshogo kolichestva kletok bakterij i drozhzhej kletki vyseivayut na tverduyu pitatelnuyu sredu na osnove zhelatina ili agar agara Dlya massovogo proizvodstva primenyayut vyrashivanie v zhidkih pitatelnyh sredah bulonah Virusnye kultury Kultury virusov vyrashivayut na kulturah kletok mlekopitayushih rastenij gribov ili bakterij v zavisimosti ot prirodnogo hozyaina konkretnogo tipa virusov No pri nekotoryh usloviyah mogut byt vyrasheny i v kletkah drugogo tipa V etom sluchae kultura kletok sama sluzhit sredoj dlya rosta i replikacii virusa Vidy kletochnyh linijEto pustoj razdel kotoryj eshe ne napisan Zdes mozhet raspolagatsya razdel posvyashyonnyj Vidy kletochnyh linij Pomogite Vikipedii napisav ego 11 fevralya 2009 Kratkij perechen kletochnyh linijPrivedyonnyj zdes spisok naibolee rasprostranyonnyh kletochnyh linij ne yavlyaetsya polnym i ischerpyvayushim Liniya kletok Rasshifrovka sokrasheniya Organizm Tkan Morfologiya Primechaniya i ssylki293 T chelovek pochka embrionalnaya Proizvodnaya ot HEK 293 ECACC3T3 cells 3 day transfer inoculum 3 x 105 cells mysh embrionalnye fibroblasty Izvestna takzhe kak NIH 3T3 CLS ECACC721 chelovek melanoma9L krysa glioblastomaA2780 chelovek yaichnik rak yaichnika ECACCA2780ADR chelovek yaichnik proizvodnoe A2780 s rezistentnostyu k adriamicinu ECACCA2780cis chelovek yaichnik proizvodnoe A2780 s rezistentnostyu k cisplatinu ECACCA172 chelovek glioblastoma zlokachestvennaya glioma CLS ECACCA431 chelovek kozhnyj epitelij ploskokletochnaya karcinoma CLS ECACCCell Line Data BaseA 549 chelovek karcinoma lyogkih epitelij CLS DSMZECACCB35 krysa nejroblastoma ATCC nedostupnaya ssylka BCP 1 chelovek perifericheskie lejkocity HIV limfoma ATCCBEAS 2B bronchial epithelium adenovirus 12 SV40 virus hybrid Ad12SV40 chelovek lyogkie epitelij ATCC nedostupnaya ssylka bEnd 3 brain endothelial mysh kora golovnogo mozga endotelij ATCCBHK 21 Baby Hamster Kidney homyak pochka fibroblasty CLS ECACCOlympus Arhivnaya kopiya ot 27 dekabrya 2009 na Wayback MachineBR 293 chelovek molochnaya zheleza rakBxPC3 Biopsy xenograph of pancreatic carcinoma line 3 chelovek pankreaticheskaya adenokarcinoma epitelij ATCC nedostupnaya ssylka C3H 10T1 2 mysh embrionalnye mezenhimalnye kletki ECACCC6 36 Aedes albopictus komar tkani lichinki ECACCCHO Chinese hamster ovary seryj homyachok Cricetulus griseus yaichnik epitelij CLS ECACCICLC nedostupnaya ssylka COR L23 chelovek lyogkie ECACCCOR L23 CPR chelovek lyogkie ECACCCOR L23 5010 chelovek lyogkie ECACCCOR L23 R23 chelovek lyogkie epitelij ECACCCOS 7 Cercopithecus aethiops origin defective SV 40 obezyana Cercopithecus aethiops pochka fibroblasty CLS ECACCATCCCML T1 Chronic Myelod Leukaemia T lymphocyte 1 chelovek hronicheskaya mieloidnaya lejkemiya T kletochnaya lejkemiya BloodCMT canine mammary tumor sobaka molochnaya zheleza epitelijD17 sobaka osteosarkoma ECACCDH82 sobaka gistiocitoz monocity makrofagi ECACC J Vir MethDU145 chelovek karcinoma prostata CLSDuCaP Dura mater Cancer of the Prostate chelovek metastaziruyushij rak prostaty epitelij 11317521EL4 mysh T kletochnaya lejkemiya ECACCEMT6 AR1 mysh molochnaya zheleza epitelij ECACCEMT6 AR10 0 mysh molochnaya zheleza epitelij ECACCFM3 chelovek metastazy v limfaticheskij uzel melanomaH1299 chelovek lyogkie rakH69 chelovek lyogkie ECACCHB54 gibridoma gibridoma sekretiruet MA2 1 mAb protiv HLA A2 i HLA B17 Journal of ImmunologyHB55 gibridoma gibridoma sekretiruet L243 mAb protiv HLA DR Human ImmunologyHCA2 chelovek fibroblasty Journal of General VirologyHEK 293 human embryonic kidney chelovek pochka embrionalnaya epitelij CLS ATCCHeLa Henrietta Lacks chelovek rak shejki matki epitelij CLS DSMZECACCHepa1c1c7 clone 7 of clone 1 hepatoma line 1 mysh gepatoma epitelij ECACC ATCC nedostupnaya ssylka HL 60 human leukemia chelovek mieloblasty kletki krovi CLS ECACCDSMZHMEC human mammary epithelial cell chelovek epitelij ECACCHT 29 chelovek epitelij tolstogo kishechnika adenokarcinoma HT 29 ECACC Cell Line Data BaseJurkat chelovek T kletochnaya lejkemiya belye kletki krovi ECACC DSMZJY chelovek limfoblasty V kletki immortalizovannye EBVK562 chelovek limfoblasty hronicheskaya mieloidnaya lejkemiya CLS ECACCKu812 chelovek limfoblasty eritrolejkemiya ECACC LGCstandardsKCL22 chelovek limfoblasty hronicheskaya mieloidnaya lejkemiyaKYO1 Kyoto 1 chelovek limfoblasty hronicheskaya mieloidnaya lejkemiya DSMZLNCap Lymph node Cancer of the Prostate chelovek adenokarcinoma prostaty epitelij CLS ECACCATCC nedostupnaya ssylka Ma Mel 1 2 3 48 chelovek linii kletok melanomyMC 38 mysh adenokarcinomaMCF 7 Michigan Cancer Foundation 7 chelovek molochnaya zheleza invazivnaya karcinoma protokov molochnoj zhelezy ER PR CLSMCF 10A Michigan Cancer Foundation chelovek molochnaya zheleza epitelij ATCCMDA MB 231 M D Anderson Metastatic Breast chelovek molochnaya zheleza rak ECACCMDA MB 468 M D Anderson Metastatic Breast chelovek molochnaya zheleza rak ECACCMDA MB 435 M D Anderson Metastatic Breast chelovek molochnaya zheleza melanoma ili karcinoma edinogo mneniya net Cambridge Pathology ECACCMDCK II Madin Darby canine kidney sobaka pochka epitelij CLS ECACC ATCCMOR 0 2R chelovek lyogkie ECACCNCI H69 CPR chelovek lyogkie ECACCNCI H69 LX10 chelovek lyogkie ECACCNCI H69 LX20 chelovek lyogkie ECACCNCI H69 LX4 chelovek lyogkie ECACCNIH 3T3 National Institutes of Health 3 day transfer inoculum 3 x 105 cells mysh embrion fibroblasty CLS ECACCATCCNALM 1 perifericheskaya krov hronicheskaya mieloidnaya lejkemiya Cancer Genetics and CytogeneticsNW 145 melanoma ESTDAB Arhivnaya kopiya ot 16 noyabrya 2011 na Wayback MachineOPCN OPCT Onyvax 1 Prostate Cancer chelovek linii kletok raka prostaty Asterand Arhivnaya kopiya ot 7 iyulya 2011 na Wayback MachinePeer chelovek T kletochnaya lejkemiya DSMZPNT 1A PNT 2 linii kletok raka prostaty ECACCRenCa Renal Carcinoma mysh karcinoma pochki CLSRIN 5F mysh podzheludochnaya zhelezaRMA RMAS mysh T kletochnyj rakSaos 2 chelovek osteoksarkoma CLS ECACCSf 9 Spodoptera frugiperda babochka Spodoptera frugiperda yaichnik CLS DSMZECACCSkBr3 chelovek karcinoma molochnoj zhelezy CLST2 chelovek gibridoma V kletok i T kletochnoj lejkemii DSMZT 47D chelovek molochnaya zheleza karcinoma protokov CLST84 chelovek karcinoma tolstogo kishechnika metastazy v legkoe epitelij 2 ECACCATCCTHP1 chelovek monocity ostraya mieloidnaya lejkemiya CLS ECACCU373 chelovek glioblastoma astrocitoma epitelijU87 chelovek glioblastoma astrocitoma epitelij CLS AbcamU937 chelovek lejkemicheskaya monocitarnaya limfoma CLS ECACCVCaP Vertebra Prostate Cancer chelovek metastaziruyushij rak prostaty epitelij ECACC ATCC Arhivnaya kopiya ot 19 fevralya 2012 na Wayback MachineVero Vera Reno pochka zelyonoj Vero istina afrikanskaya zelyonaya martyshka epitelij pochki CLS ECACCWM39 chelovek kozha pervichnaya melanomaWT 49 chelovek limfoblastyX63 mysh melanomaYAC 1 mysh limfoma Cell Line Data Base CLS ECACCYAR chelovek B limfocity transformirovany EBV 3 Human Immunology Arhivnaya kopiya ot 20 sentyabrya 2008 na Wayback MachineSm takzheBiologicheskoe bessmertie Kultura tkanej Vyrashivanie organov Biotehnologiya Inducirovannye stvolovye kletki Nisha stvolovoj kletki Pitatelnaya sreda dlya embrionov Kultura kletok i tkanejPrimechaniyaRastvor Ringera Arhivirovannaya kopiya neopr Data obrasheniya 24 marta 2009 Arhivirovano iz originala 1 sentyabrya 2006 goda Alberts B Brej D Lyuis Dzh Reff M Roberts K Uotson Dzh Molekulyarnaya biologiya kletki V 3 h t 2 e izd pererab M75 i dop T 1 Per s angl M Mir 1994 517 s il ISBN 5 03 001985 5 Kletki mozhno vydelit iz tkanej i razdelit na razlichnye tipy neopr Data obrasheniya 24 marta 2009 Arhivirovano iz originala 26 maya 2009 goda LaboRUtoriya Kultivirovanie kletok i tkanej neopr www primer ru 2003 Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 10 maya 2003 goda Telomeraza neopr Tyomnaya materiya 15 sentyabrya 2006 Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 20 dekabrya 2007 goda Maqsood MI Matin MM Bahrami AR Ghasroldasht MM 2013 Immortality of cell lines challenges and advantages of establishment Cell Biology International 37 10 1038 1045 doi 10 1002 cbin 10137 PMID 23723166 Inkubatory SO2 Binder Germaniya neopr Tehservis Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 19 noyabrya 2012 goda Laboratornoe oborudovanie i rashodnye materialy Inkubatory neopr 2007 Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 8 iyunya 2012 goda S pomoshyu sred opredelyonnogo himicheskogo sostava mozhno identificirovat specificheskie faktory rosta neopr Data obrasheniya 24 marta 2009 Arhivirovano iz originala 10 noyabrya 2007 goda LipiMAX purified lipoprotein solution from bovine serum neopr Selborne Biological Services 2006 Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 8 iyunya 2012 goda Lyundup A V Demchenko A G Tenchurin T H Krasheninnikov M E Klabukov I D Shepelev A D Mamagulashvili V G Oganesyan R V Orehov A S Chvalun S N Dyuzheva T G Povyshenie effektivnosti zaseleniya biodegradiruemyh matriksov stromalnymi i epitelialnymi kletkami pri dinamicheskom kultivirovanii Geny i kletki 2016 T 11 3 S 102 107 ISSN 2313 1829 Guller A E Grebenyuk P N Shehter A B Zvyagin A V Deev S M Tkanevaya inzheneriya opuholej s ispolzovaniem bioreaktornyh tehnologij Acta Naturae russkoyazychnaya versiya 2016 T 8 3 S 49 65 ISSN 2075 8243 Mehanizm inficirovaniya virusa V Bogomolova Komu prinadlezhit nashe telo neopr Arcanus 3 avgusta 2009 Data obrasheniya 27 marta 2010 Arhivirovano 5 marta 2016 goda Ssylkihttp www liv ac uk sd21 tisscult what htm
