Поликлональные антитела
Поликлональные антитела — антитела, образующиеся в сыворотке крови в разных клонах B-лимфоцитов и связываются с различными антигенными детерминантами (эпитопами) молекулы-мишени (антигена).
Смесь антител, выделенную из сыворотки крови, называют поликлональным препаратом. Поликлональные антитела ранее широко использовались в иммунодиагностике, для их получения использовались иммунизированные животные (обычно кролики). Кролики используются потому что: во-первых, этих животных легко содержать, во-вторых, у человека относительно редко образуются антитела против белков кролика по сравнению с другими видами, такими как козы. Так же, антитела кролика преципитируют белки человека в широком диапазоне избыточного количества как антигена, так и антитела. Богатый селекционный опыт для достижения оптимального иммунного ответа привел к тому, что чаще всего для продукции поликлональных антител используется новозеландская порода кроликов-альбиносов. В ответ на иммунизацию антигеном (также известным как иммуноген) в дозировке от 10 мкг до 200 мкг, у кроликов образуются поликлональные антитела. Как правило, она выполняется внутрикожно или подкожно, но может быть выполнена в подушечку стопы, мышцу или брюшную полость. Антиген может быть приготовлен с адъювантом, который может усилить иммунный ответ (таким как полный или неполный адъювант Freund), или без него. Для менее иммуногенных белков или пептидов иммуноген может также быть соединен с белком-носителем, таким как гемоцианин лимфы улитки (KLH), бычий сывороточный альбумин (BSA), яичный альбумин (OVA) и очищенный белковый дериват туберкулина (PPD). Иммунизация длится от 3 до 8 месяцев, при этом животному обычно проводятся бустер-инъекции иммуногена один раз в две недели. У кроликов кровь забирают из уха, у более крупных животны из яремной вены или из сердца после умерщвления животного. Удаляя клетки из крови с помощью центрифугирования, приготавливается сыворотка, при этом раствор поликлональных антител может быть использован в форме стабилизированной антисыворотки или дополнительно очищен. Иммуноглобулин очищаетсяот других сывороточных белков путем фракционирования сульфатомаммония и ионообменной хроматографии, очистки белком А или G или выделением методом аффинной хроматогра.
Использование поликлональных антител имеет два недостатка, существенных для некоторых методов диагностики:
- содержание отдельных антител в поликлональном препарате может варьировать от одной партии к другой;
- поликлональные антитела нельзя применять, если необходимо различить две подобные мишени, например, когда патогенная (мишень) и непатогенная (не-мишень) формы различаются единственной детерминантой.
На смену поликлональным были разработаны препараты антител, специфичные к одной определённой антигенной детерминанте, то есть препараты моноклональных антител. Однако поликлональные антитела сохраняют некоторое использование в иммунодиагностике и лабораторных исследованиях — прежде всего из-за низкой стоимости их получения.
Примечания
- George L. Kumar, Lars Rudbeck. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ Руководство / Пер. с англ. Н.В. Даниловой, Л.В. Москвиной, Н.М. Гайфуллина, под общ.ред. П.Г. Малькова, науч. ред. Г.А. Франк. — Москва, 2011. — С. 20. — 228 с. — ISBN ISBN 978-5-91366-295-8.
В статье не хватает ссылок на источники (см. рекомендации по поиску). |
В другом языковом разделе есть более полная статья Polyclonal antibodies (англ.). |
Википедия, чтение, книга, библиотека, поиск, нажмите, истории, книги, статьи, wikipedia, учить, информация, история, скачать, скачать бесплатно, mp3, видео, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, картинка, музыка, песня, фильм, игра, игры, мобильный, телефон, Android, iOS, apple, мобильный телефон, Samsung, iphone, xiomi, xiaomi, redmi, honor, oppo, nokia, sonya, mi, ПК, web, Сеть, компьютер, Информация о Поликлональные антитела, Что такое Поликлональные антитела? Что означает Поликлональные антитела?
Poliklonalnye antitela antitela obrazuyushiesya v syvorotke krovi v raznyh klonah B limfocitov i svyazyvayutsya s razlichnymi antigennymi determinantami epitopami molekuly misheni antigena Smes antitel vydelennuyu iz syvorotki krovi nazyvayut poliklonalnym preparatom Poliklonalnye antitela ranee shiroko ispolzovalis v immunodiagnostike dlya ih polucheniya ispolzovalis immunizirovannye zhivotnye obychno kroliki Kroliki ispolzuyutsya potomu chto vo pervyh etih zhivotnyh legko soderzhat vo vtoryh u cheloveka otnositelno redko obrazuyutsya antitela protiv belkov krolika po sravneniyu s drugimi vidami takimi kak kozy Tak zhe antitela krolika precipitiruyut belki cheloveka v shirokom diapazone izbytochnogo kolichestva kak antigena tak i antitela Bogatyj selekcionnyj opyt dlya dostizheniya optimalnogo immunnogo otveta privel k tomu chto chashe vsego dlya produkcii poliklonalnyh antitel ispolzuetsya novozelandskaya poroda krolikov albinosov V otvet na immunizaciyu antigenom takzhe izvestnym kak immunogen v dozirovke ot 10 mkg do 200 mkg u krolikov obrazuyutsya poliklonalnye antitela Kak pravilo ona vypolnyaetsya vnutrikozhno ili podkozhno no mozhet byt vypolnena v podushechku stopy myshcu ili bryushnuyu polost Antigen mozhet byt prigotovlen s adyuvantom kotoryj mozhet usilit immunnyj otvet takim kak polnyj ili nepolnyj adyuvant Freund ili bez nego Dlya menee immunogennyh belkov ili peptidov immunogen mozhet takzhe byt soedinen s belkom nositelem takim kak gemocianin limfy ulitki KLH bychij syvorotochnyj albumin BSA yaichnyj albumin OVA i ochishennyj belkovyj derivat tuberkulina PPD Immunizaciya dlitsya ot 3 do 8 mesyacev pri etom zhivotnomu obychno provodyatsya buster inekcii immunogena odin raz v dve nedeli U krolikov krov zabirayut iz uha u bolee krupnyh zhivotny iz yaremnoj veny ili iz serdca posle umershvleniya zhivotnogo Udalyaya kletki iz krovi s pomoshyu centrifugirovaniya prigotavlivaetsya syvorotka pri etom rastvor poliklonalnyh antitel mozhet byt ispolzovan v forme stabilizirovannoj antisyvorotki ili dopolnitelno ochishen Immunoglobulin ochishaetsyaot drugih syvorotochnyh belkov putem frakcionirovaniya sulfatomammoniya i ionoobmennoj hromatografii ochistki belkom A ili G ili vydeleniem metodom affinnoj hromatogra Ispolzovanie poliklonalnyh antitel imeet dva nedostatka sushestvennyh dlya nekotoryh metodov diagnostiki soderzhanie otdelnyh antitel v poliklonalnom preparate mozhet varirovat ot odnoj partii k drugoj poliklonalnye antitela nelzya primenyat esli neobhodimo razlichit dve podobnye misheni naprimer kogda patogennaya mishen i nepatogennaya ne mishen formy razlichayutsya edinstvennoj determinantoj Na smenu poliklonalnym byli razrabotany preparaty antitel specifichnye k odnoj opredelyonnoj antigennoj determinante to est preparaty monoklonalnyh antitel Odnako poliklonalnye antitela sohranyayut nekotoroe ispolzovanie v immunodiagnostike i laboratornyh issledovaniyah prezhde vsego iz za nizkoj stoimosti ih polucheniya PrimechaniyaGeorge L Kumar Lars Rudbeck IMMUNOGISTOHIMIChESKIEIMMUNOGISTOHIMIChESKIE METODY Rukovodstvo Per s angl N V Danilovoj L V Moskvinoj N M Gajfullina pod obsh red P G Malkova nauch red G A Frank Moskva 2011 S 20 228 s ISBN ISBN 978 5 91366 295 8 V state ne hvataet ssylok na istochniki sm rekomendacii po poisku Informaciya dolzhna byt proveryaema inache ona mozhet byt udalena Vy mozhete otredaktirovat statyu dobaviv ssylki na avtoritetnye istochniki v vide snosok 10 maya 2012 V drugom yazykovom razdele est bolee polnaya statya Polyclonal antibodies angl Vy mozhete pomoch proektu rasshiriv tekushuyu statyu s pomoshyu perevoda
